（1）外植體的選擇 常用的外植體有兩類，一類是帶芽的外植體，如莖尖、側(cè)芽、鱗芽、原球莖等，一類根、莖、葉等營(yíng)養(yǎng)器官和花藥、花瓣、花軸、花萼、胚珠、果實(shí)等生殖器官。其中最常用的外植體是莖尖，通常切塊在0.5厘米左右，培養(yǎng)脫毒種苗，常用莖尖分生組織部，長(zhǎng)度為0.1毫米以下。
（2）外植體的滅菌 常用的消毒劑有次氯酸鈣、升汞、次氯酸鈉、雙氧水、70%酒精等。
（3）外植體接種 外植體接種需在無(wú)菌條件下進(jìn)行。工作人員應(yīng)穿工作服，戴口罩，用70%酒精擦手，超凈工作臺(tái)上要用70%酒精擦凈。接種用的剪刀、鑷子和器皿都要求無(wú)菌。接種后的培養(yǎng)容器置培養(yǎng)室，室溫應(yīng)控制在23～26℃，每天12～16小時(shí)光照，光照度為1000～3000勒克斯。



（4）誘導(dǎo)側(cè)芽、不定芽或胚狀體 常用的基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。激素的種類和濃度對(duì)外植體的分化和增殖起著重要的作用，不同的花卉對(duì)激素的種類和濃度要求有差異。
（5）誘導(dǎo)生根 繼代培養(yǎng)形成的不定芽和側(cè)芽等一般沒(méi)有根，要促使試管苗生根，須轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基一般應(yīng)用1／2MS培養(yǎng)基，因?yàn)榻档蜔o(wú)機(jī)鹽濃度有利于根的分化。不同盆栽花卉誘導(dǎo)生根時(shí)所需要的生長(zhǎng)素的種類和濃度不同，一般常用吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）和吲哚丁酸（IBA）三種。
（6）煉苗 首先打開(kāi)試管瓶塞，放陽(yáng)光充足處讓其鍛煉1～2天，然后取出幼苗，用溫水將瓊脂沖洗掉，移栽到泥炭、珍珠巖、蛭石、礱糠灰等組成的基質(zhì)中?；|(zhì)使用前需高溫消毒。移栽后要適當(dāng)遮蔭，可用塑料薄膜覆蓋，保持較高空氣濕度，溫度維持在25℃左右，勿使陽(yáng)光直曬。7～10天后要注意通風(fēng)和補(bǔ)充澆水。20～40天，新梢開(kāi)始生長(zhǎng)后，小苗可轉(zhuǎn)入正常管理。