面包蟲的養(yǎng)殖和繁殖技術(shù)
一、面包蟲的養(yǎng)殖和繁殖技術(shù)
一、器材準備
選擇通風好、干燥、無鼠害的房屋;養(yǎng)殖槽可以用盆箱等,體積可大可小,內(nèi)壁要光滑。如規(guī)模養(yǎng)殖,養(yǎng)殖槽可統(tǒng)一訂做,便于放置及管理。產(chǎn)卵箱用木板及鐵紗網(wǎng)訂做而成,底用鐵紗網(wǎng),網(wǎng)眼以蟲逃不出為宜,箱體下有接卵板,篩子用來分離糞便,可用木板及紗網(wǎng)訂做,網(wǎng)眼以幼蟲漏不出為宜。
二、繁殖
面包蟲生長周期約4個月,屬完全變態(tài)昆蟲(卵一幼蟲一蛹一成蟲)。作為繁殖用的面包蟲最好從幼蟲階段選擇,這樣便于優(yōu)化良種。一般選擇無病、無傷、個體大、光澤好的幼蟲。幼蟲經(jīng)最后一次脫皮變成蛹,將蛹撿出專槽羽化,可以防止被幼蟲咬食。
經(jīng)過5―6天羽化為黑色的成蟲。這時將同一時期的成蟲放人產(chǎn)卵箱,每箱以單個密布箱底為宜。在箱底與接卵板之間放置一張紙作為產(chǎn)卵箔。
同時投喂麩皮及萊葉,經(jīng)過5天左右的交配產(chǎn)卵,可以取出卵箔換上新的卵箔。把同一天取出的卵箔放在一起,每箱4―6箔,在箔上撤些麩皮。再經(jīng)過6天左右可以孵化出乳白色幼蟲,取出卵箔轉(zhuǎn)入幼蟲的養(yǎng)殖。
三、養(yǎng)殖
孵化后的幼蟲要精養(yǎng),以多投玉米面、麩皮為主,隨著個體增長,增加飼料的多樣化。以麩皮、稻糠、干剩飯為主,輔以果瓜皮、萊葉,注意槽中幼蟲數(shù)量,以1.5―2公斤/槽多了及時分槽,每隔2―3天添加一次飼料,飼料幼蟲比為1:1,每7天左右清理一次糞便,經(jīng)過約3個月的飼養(yǎng)即可作為餌料用。
四、管理
養(yǎng)殖期間經(jīng)常翻動幼蟲,防止局部過熱造成死亡。不喂變質(zhì)發(fā)霉的飼料及帶水的果瓜皮菜葉。保持室內(nèi)通風干燥,防止潮濕;防止各類農(nóng)藥物噴灑。在冬季可在室內(nèi)加設煤球爐或電爐來控制生長適宜溫度,一般控制在18―32℃之內(nèi)。
二、鐵皮石斛的快速繁殖是微型繁殖技術(shù)嗎
是。鐵皮石斛種子試管苗是快速繁殖技術(shù),以鐵皮石斛的種子為外植體。在不同培養(yǎng)基、不同的激素組合進行誘導產(chǎn)生試管苗,采用植物組織培養(yǎng)科技,技術(shù)進行快速繁殖正在成為這一領(lǐng)域研究熱點。
三、克隆技術(shù)是有性繁殖嗎?
克隆技術(shù)即無性繁殖技術(shù)。通常的有性生殖是由雌雄交配,精子和卵子結(jié)合發(fā)育成胚胎,經(jīng)妊娠后產(chǎn)出新的個體??寺〖夹g(shù)不需要雌雄交配,不需要精子和卵子的結(jié)合,只需從動物身上提取一個單細胞,用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎,再將胚胎植入雌性動物體內(nèi),就可孕育出新的個體。這種以單細胞培養(yǎng)出來的克隆動物,具有與單細胞供體完全相同的特征,是單細胞供體的“復制品”。英國英格蘭科學家和美國俄勒岡科學家先后培養(yǎng)出了“克隆羊”和“克隆猴”??寺〖夹g(shù)的成功,被人們稱為“歷史性的事件,科學的創(chuàng)舉”。有人甚至認為,克隆技術(shù)可以同當年原子彈的問世相提并論。
四、克隆~~~克隆的基本資料!!!
克隆技術(shù)
克隆技術(shù)即無性繁殖技術(shù)。通常的有性生殖是由雌雄交配,精子和卵子結(jié)合發(fā)育成胚胎,經(jīng)妊娠后產(chǎn)出新的個體??寺〖夹g(shù)不需要雌雄交配,不需要精子和卵子的結(jié)合,只需從動物身上提取一個單細胞,用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎,再將胚胎植入雌性動物體內(nèi),就可孕育出新的個體。這種以單細胞培養(yǎng)出來的克隆動物,具有與單細胞供體完全相同的特征,是單細胞供體的“復制品”。英國英格蘭科學家和美國俄勒岡科學家先后培養(yǎng)出了“克隆羊”和“克隆猴”??寺〖夹g(shù)的成功,被人們稱為“歷史性的事件,科學的創(chuàng)舉”。有人甚至認為,克隆技術(shù)可以同當年原子彈的問世相提并論。
克隆技術(shù)可以用來生產(chǎn)“克隆人”,可以用來“復制”人,因而引起了全世界的廣泛關(guān)注。對人類來說,克隆技術(shù)是悲是喜,是禍是福?唯物辯證法認為,世界上的任何事物都是矛盾的統(tǒng)一體,都是一分為二的??寺〖夹g(shù)也是這樣。如果克隆技術(shù)被用于“復制”像希特勒之類的戰(zhàn)爭狂人,那會給人類社會帶來什么呢?即使是用于“復制”普通的人,也會帶來一系列的倫理道德問題。如果把克隆技術(shù)應用于畜牧業(yè)生產(chǎn),將會使優(yōu)良牲畜品種的培育與繁殖發(fā)生根本性的變革。若將克隆技術(shù)用于基因治療的研究,就極有可能攻克那些危及人類生命健康的癌癥、艾滋病等頑疾。克隆技術(shù)猶如原子能技術(shù),是一把雙刃劍,劍柄掌握在人類手中。人類應該采取聯(lián)合行動,避免“克隆人”的出現(xiàn),使克隆技術(shù)造福于人類社會。
――《素質(zhì)教育新學案》
克隆技術(shù)的危害?
...盡管如此,克隆技術(shù)的巨大理論意義和實用價值促使科學家們加快了研究的步伐,從而使動物克隆技術(shù)的研究與開發(fā)進入一個高潮。 ... ...這些成果說明克隆技術(shù)有可能成為保護和拯救瀕危動物的一條新途徑。 四、克隆技術(shù)的應用前景 克隆技術(shù)已展示出廣闊的應...
寒冰163 - 2005-12-7 19:38 - 最佳回答者: 十字軍刀客 - 教育/科學 > 自然科學
克隆技術(shù)是怎么回事?
克隆技術(shù) 克隆技術(shù)即無性繁殖技術(shù)。通常的有性生殖是由雌雄交配,精子和卵子結(jié)合發(fā)育成胚胎,經(jīng)妊娠后產(chǎn)出新的個體。克隆技術(shù)不需要雌雄交配,不需要精子和卵子的結(jié)合,只需從動物身上提取一個單細胞,用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎,再將胚胎植入雌性動...
sfn123 - 17:52 - 最佳回答者: 272928861ml - 教育/科學
克隆技術(shù)有關(guān)資料
...科學家把人工遺傳操作動、植物的繁殖過程叫克隆,這門生物技術(shù)叫克隆技術(shù)。 克隆技術(shù)的設想是由德國胚胎學家于1938年首次提 出的,1952年,科學家首先用青蛙開展克隆實驗,之后不斷有人利用各種動物進行克隆技術(shù)研究。由于該項技術(shù)幾乎沒有取得進展,研究...
jywjyw333 - 2006-3-5 13:42 - 最佳回答者: leijunyu - 教育/科學 > 學習幫助
我國的克隆技術(shù)是世界前列嗎?
... 動物克隆技術(shù)被生物科學家譽為“生物原子彈”,各國都在競相發(fā)展。動物克隆技術(shù)分胚胎克隆和體細胞克隆。相比而言,體細胞克隆... ... 西北農(nóng)林科技大學動物克隆技術(shù)科研群體,在1990年就掌握了胚胎克隆技術(shù),繁育出世界首批克隆山羊。1995年又利用胚胎克隆技術(shù),...
仙人指3 - 2005-9-21 13:01 - 最佳回答者: 我字不帥 - 教育/科學 > 自然科學
以現(xiàn)在的克隆技術(shù)能把一個死去的人克隆出來嗎????
只有有這個人的活細胞。提取這個細胞的DNA,然后通過RNA復制出千千萬萬個細胞。以現(xiàn)在的克隆技術(shù)是可以做到的。以前這個人某處... ...目前的克隆技術(shù),只能克隆生命的肉體而已,并不能克隆生命的“靈魂”。也就是說,克隆出來的人無感情,以前學過的東西、遇過的...
shundechaoren - 2006-2-20 18:10 - 最佳回答者: kingkongs - 教育/科學 > 自然科學
克隆技術(shù)和第一只克隆羊的情況
...它的誕生被視為20世紀末最重要的科學成就之一,它引發(fā)了全世界科學家研究克隆技術(shù)的熱潮,也導致了大量技術(shù)和倫理方面的爭論。 ... ...當時,曾領(lǐng)導克隆多利的研究的伊恩?威爾穆特教授曾表示,多利患有關(guān)節(jié)炎可能意味著克隆技術(shù)“效率低”,需要進一步研究。(完) ...
5072159 - 2005-10-9 20:36 - 最佳回答者: 晉山河 - 社會/文化
克隆技術(shù)是什么東西
克隆技術(shù)其實就是從動物A上拿一個細胞,取出細胞核!再到同種動物B的身上拿一個細胞,去掉細胞核!把取出來的細胞核放到另一個去掉細胞核的細胞中!再把它放到同種動物母體C的子宮中!這樣將C將會生出一個和A一模一樣的動物來!還有就是直接拿一種動物的細胞...
wasong - 2005-10-7 16:18 - 最佳回答者: 紫色殘云 - 教育/科學 > 入學信息
能不能用克隆技術(shù)增加大熊貓的數(shù)量?為什么?
...而克隆技術(shù)則不能增加大熊貓的進化過程。 自上世紀90年代以來,北京動物園、四川大熊貓繁育中心、臥龍自然保護區(qū)的大熊貓繁育中心等幾個地方都比較成功地繁殖了大熊貓;而在秦嶺650平方公里的地方,大約150只大熊貓在13年的時間內(nèi)始終處于相對穩(wěn)定的狀...
小小花生 - 21:42 - 最佳回答者: 我是張楚 - 教育/科學 > 自然科學
克隆技術(shù)會在生活中應用嗎?為什么?
看運用在什么地方因為現(xiàn)在的克隆技術(shù)還不是很發(fā)達,掌握得也不是很到位,所以容易出些差錯。如果運用得好的話,可以運用到人體重要器官的移植以及對稀有動物的繁衍但對人的克隆還在爭論中,因為這樣不利于人的辨認與管理。容易出現(xiàn)政治問題
409257127 - 2005-11-4 20:39 - 最佳回答者:匿名 - 教育/科學 > 自然科學
法律更有利于控制克隆技術(shù)的惡性發(fā)展
不是法律有利于干嗎,而是制定相應規(guī)制的法律更有利于控制克隆技術(shù)惡性發(fā)展。
克隆”是從英文“clone”音譯而來,在生物學領(lǐng)域有3個不同層次的含義。
1.在分子水平,克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含義是將某一特定DNA片斷通過重組DNA技術(shù)插入到一個載體(如質(zhì)粒和病毒等)中,然后在宿主細胞中進行自我復制所得到的大量完全相同的該DNA片斷的“群體”。
2.在細胞水平,克隆實質(zhì)由一個單一的共同祖先細胞分裂所形成的一個細胞群體。其中每個細胞的基因都相同。比如,使一個細胞在體外的培養(yǎng)液中分裂若干代所形成的一個遺傳背景完全相同的細胞集體即為一個細胞克隆。又如,在脊椎動物體內(nèi),當有外源物(如細菌或病毒)侵入時,會通過免疫反應產(chǎn)生特異的識別抗體。產(chǎn)生某一特定抗體的所有漿細胞都是由一個B細胞分裂而成,這樣的一個漿細胞群體也是一個細胞克隆。細胞克隆是一種低級的生殖方式-無性繁殖,即不經(jīng)過兩性結(jié)合,子代和親代具有相同的遺傳性。生物進化的層次越低,越有可能采取這種繁殖方式。
3.在個體水平,克隆是指基因型完全相同的兩個或更多的個體組成的一個群體。比如,兩個同卵雙胞胎即為一個克?。∫驗樗ㄋ﹤儊碜酝粋€卵細胞,所以遺傳背景完全一樣。按此定義,“多利”并不能說成是一個克?。∫驗椤岸嗬敝皇枪聠蔚囊粋€。只有當那些英國胚胎學家能將兩個以上完全相同的細胞核移植到兩個以上完全相同的去核卵細胞中,得到兩個以上遺傳背景完全相同的“多利”時才能用克隆這個詞來描述。所以在那篇發(fā)表于1997年2月出版在《Nature》雜志上的轟動性論文中,作者并沒有把“多利”說成是一個克隆。
另外,克隆也可以做動詞用,意思是指獲得以上所言DNA、細胞或個體群體的過程。
二、克隆技術(shù)
1.DNA克隆
現(xiàn)在進行DNA克隆的方法多種多樣,其基本過程如下圖所示(未按比例)
可見,這樣得到的DNA可以應用于生物學研究的很多方面,包括對特異DNA的堿基順序的分析和處理,以及生物技術(shù)工業(yè)中有價值蛋白質(zhì)的大量生產(chǎn)等等。
2.生物個體的克隆
(1)植物個體的克隆
在20世紀50年代,植物學家用胡蘿卜為模型材料,研究了分化的植物細胞中遺傳物質(zhì)是否丟失問題,他們驚奇地發(fā)現(xiàn),從一個單一已經(jīng)高度分化的胡蘿卜細胞
可以發(fā)育形成一棵完整的植株!由此,他們認為植物細胞具有全能性。從一棵胡蘿卜中的兩個以上的體細胞發(fā)育而成的胡蘿卜群體的遺傳背景完全一樣,故為一個克隆。如此的植物的克隆過程是一個完全的無性繁殖過程!
(2)動物個體的克隆
① “多利”的誕生
1997年2月27日英國愛丁堡羅斯林(Roslin)研究所的伊恩?維爾莫特科學研究小組向世界宣布,世界上第一頭克隆綿羊“多利”(Dolly)誕生,這一消息立刻轟動了全世界。
“多莉”的產(chǎn)生與三只母羊有關(guān)。一只是懷孕三個月的芬蘭多塞特母綿羊,兩只是蘇格蘭黑面母綿羊。芬蘭多塞特母綿羊提供了全套遺傳信息,即提供了細胞核(稱之為供體);一只蘇格蘭黑面母綿羊提供無細胞核的卵細胞;另一只蘇格蘭黑面母綿羊提供羊胚胎的發(fā)育環(huán)境――子宮,是“多莉”羊的“生”母。其整個克隆過程簡述如下:
從芬蘭多塞特母綿羊的乳腺中取出乳腺細胞,將其放入低濃度的營養(yǎng)培養(yǎng)液中,細胞逐漸停止了分裂,此細胞稱之為供體細胞;給一頭蘇格蘭黑面母綿羊注射促性腺素,促使它排卵,取出未受精的卵細胞,并立即將其細胞核除去,留下一個無核的卵細胞,此細胞稱之為受體細胞;利用電脈沖的方法,使供體細胞和受體細胞發(fā)生融合,最后形成了融合細胞,由于電脈沖還可以產(chǎn)生類似于自然受精過程中的一系列反應,使融合細胞也能象受精卵一樣進行細胞分裂、分化,從而形成胚胎細胞;將胚胎細胞轉(zhuǎn)移到另一只蘇格蘭黑面母綿羊的子宮內(nèi),胚胎細胞進一步分化和發(fā)育,最后形成一只小綿羊。出生的“多莉”小綿羊與多塞特母綿羊具有完全相同的外貌。
一年以后,另一組科學家報道了將小鼠卵丘細胞(圍繞在卵母細胞外周的高度分化細胞)的細胞核移植到去除了細胞核的卵母細胞中得到20多只發(fā)育完全的小鼠。如呆“多利”因為只有一只,還不夠叫做克隆羊的話,這些小鼠
就是名副其實的克隆鼠了。
② 通過細胞核移植克隆小鼠的基本過程
在本實驗中,卵丘細胞是經(jīng)如下過程得到的:通過連續(xù)幾次注射絨毛膜促性腺激素,使雌鼠誘導成高產(chǎn)卵量狀態(tài)。然后從雌鼠輸卵管中收集卵丘細胞與卵母細胞的復合體。經(jīng)透明質(zhì)酸處理使卵丘細胞散開。選擇直徑為10-12微米的卵丘細胞用作細胞核供體(前期實驗表明,若用直徑更小或更大的卵丘細胞的細胞核,經(jīng)過細胞核移植的卵母細胞很少發(fā)育到8細胞期)。所選擇的卵丘細胞保持在一定的溶液環(huán)境中,在3小時內(nèi)進行細胞核移植(與此不同的是,在獲得“多利”時用作細胞核供體的乳腺細胞先在培養(yǎng)液中傳代了3-6次)
卵母細胞(一般處于減數(shù)分裂中期 II )通過與上面描述類似的方法,從不同種的雌鼠中收集。在顯微鏡下小心地用直徑大約7微米的細管取出卵母細胞的細胞核,盡量不取出細胞質(zhì)。同樣小心取出卵丘細胞的細胞核,也盡量去除所帶的細胞質(zhì)(通過使取出的細胞核在玻璃管中往復運動數(shù)次,以去除所帶的少量的細胞質(zhì))。在細胞核被取出后5分鐘之內(nèi),直接注射到已經(jīng)去除了細胞核的卵母細胞中。進行了細胞核移植的卵母細胞先放在一種特制的溶液中1-6小時,然后加入二價的鍶離子(Sr2+)和細胞分裂抑素B。前者使卵母細胞激活,后者抑制極體的形成和染色體的排除。再取出處理過的卵母細胞,放在沒有鍶和細胞分裂抑素B的特制的溶液中使細胞分裂形成胚胎。
不同階段的胚胎(從2細胞期到胚泡期)被分別植入幾天前與已經(jīng)結(jié)扎雄鼠交配過的假孕母鼠的輸卵管或子宮中發(fā)育。發(fā)育完全的胎兒鼠在大約19天后通過手術(shù)取出。
目前胚胎細胞核移植克隆的動物有小鼠、兔、山羊、綿羊、豬、牛和猴子等。在中國,除猴子以外,其他克隆動物都有,也能連續(xù)核移植克隆山羊,該技術(shù)比胚胎分割技術(shù)更進一步,將克隆出更多的動物。因胚胎分割次數(shù)越多,每份細胞越少,發(fā)育成的個體的能力越差。體細胞核移植克隆的動物只有一個,就是“多利”羊。
三、克隆技術(shù)的福音
1. 克隆技術(shù)與遺傳育種
在農(nóng)業(yè)方面,人們利用“克隆”技術(shù)培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病蟲害的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)品種,大大提高了糧食產(chǎn)量。在這方面我國已邁入世界最先進的前列。
2. 克隆技術(shù)與瀕危生物保護
克隆技術(shù)對保護物種特別是珍稀、瀕危物種來講是一個福音,具有很大的應用前景。從生物學的角度看,這也是克隆技術(shù)最有價值的地方之一。
3. 克隆技術(shù)與醫(yī)學
在當代,醫(yī)生幾乎能在所有人類器官和組織上施行移植手術(shù)。但就科學技術(shù)而言,器官移植中的排斥反應仍是最為頭痛的事。排斥反應的原因是組織不配型導致相容性差。如果把“克隆人”的器官提供給“原版人”,作器官移植之用,則絕對沒有排斥反應之慮,因為二者基因相配,組織也相配。問題是,利用“克隆人”作為器官供體合不合乎人道?是否合法?經(jīng)濟是否合算?
克隆技術(shù)還可用來大量繁殖有價值的基因,例如,在醫(yī)學方面,人們正是通過“克隆”技術(shù)生產(chǎn)出治療糖尿病的胰島素、使侏儒癥患者重新長高的生長激素和能抗多種病毒感染的干撓素,等等。
克隆技術(shù)即無性繁殖技術(shù)。通常的有性生殖是由雌雄交配,精子和卵子結(jié)合發(fā)育成胚胎,經(jīng)妊娠后產(chǎn)出新的個體??寺〖夹g(shù)不需要雌雄交配,不需要精子和卵子的結(jié)合,只需從動物身上提取一個單細胞,用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎,再將胚胎植入雌性動物體內(nèi),就可孕育出新的個體。這種以單細胞培養(yǎng)出來的克隆動物,具有與單細胞供體完全相同的特征,是單細胞供體的“復制品”。英國英格蘭科學家和美國俄勒岡科學家先后培養(yǎng)出了“克隆羊”和“克隆猴”??寺〖夹g(shù)的成功,被人們稱為“歷史性的事件,科學的創(chuàng)舉”。有人甚至認為,克隆技術(shù)可以同當年原子彈的問世相提并論。
克隆技術(shù)可以用來生產(chǎn)“克隆人”,可以用來“復制”人,因而引起了全世界的廣泛關(guān)注。對人類來說,克隆技術(shù)是悲是喜,是禍是福?唯物辯證法認為,世界上的任何事物都是矛盾的統(tǒng)一體,都是一分為二的??寺〖夹g(shù)也是這樣。如果克隆技術(shù)被用于“復制”像希特勒之類的戰(zhàn)爭狂人,那會給人類社會帶來什么呢?即使是用于“復制”普通的人,也會帶來一系列的倫理道德問題。如果把克隆技術(shù)應用于畜牧業(yè)生產(chǎn),將會使優(yōu)良牲畜品種的培育與繁殖發(fā)生根本性的變革。若將克隆技術(shù)用于基因治療的研究,就極有可能攻克那些危及人類生命健康的癌癥、艾滋病等頑疾??寺〖夹g(shù)猶如原子能技術(shù),是一把雙刃劍,劍柄掌握在人類手中。人類應該采取聯(lián)合行動,避免“克隆人”的出現(xiàn),使克隆技術(shù)造福于人類社會。
克?。╟lone)是指通過無性生殖而產(chǎn)生的遺傳上均一的生物群,即具有完全相同的遺傳組成的一群細胞或者生物的個體??寺≡谙ED語中是“小樹枝葉”的意思,用以指無性增殖物?,F(xiàn)在則指個體、細胞、基因等不同水平上的無性增殖物。(1)個體水平:在植物的無性增殖中,植物的發(fā)芽、插條等由同一個體通過無性生殖而增長的個體群均被視為克隆。采用組織培養(yǎng)方法可使植物細胞培養(yǎng)發(fā)育成完全的個體(愈傷組織),采用這種方法得到的具有相同基因型的個體群,也被稱為克??;在動物的無性增殖中,典型的例子是采用核移植實驗方法,把分化細胞的核移植到一個事先去核的蛙卵中,讓其發(fā)育并得到克隆蛙??寺游锞哂芯贿z傳性質(zhì),在研究環(huán)境條件對發(fā)育、分化的影響以及藥物的檢測方面都是重要的實驗材料。在哺乳動物中,由于細胞分化,核異質(zhì)化的程度加劇,因此核移植尚無成功的例子。(2)細胞水平:由一個細胞經(jīng)過有絲分裂生成的細胞群叫克隆。但如果培養(yǎng)細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化,則很容易引起染色體變異。(3)基因水平:利用基因重組操作技術(shù),使特定的基因與載體結(jié)合,在細菌等宿主中進行增殖,有可能得到均勻的基因群??寺』蛟诨蚬δ芘c精細結(jié)構(gòu)的關(guān)系等基礎研究及在有用物質(zhì)的生產(chǎn)方面,均已得到應用。
在上述3種水平上,增殖并分離獲得單一的克隆群稱為克隆化。此時,克隆一詞也可作為動詞理解。克隆是重組DNA技術(shù)的核心部分。事實上,克隆技術(shù)現(xiàn)已被人們用來通過營養(yǎng)方式繁殖病毒等微生物和植物的純種,從而保證了這些生物基因組的準確連續(xù)性?,F(xiàn)在,克隆這個詞還包括單個自主遺傳因子的分離與保存。細胞生物的克隆只需要營養(yǎng)培養(yǎng)基,而基因的克隆則需要某種載體復制子、特定的寄主細胞和營養(yǎng)培養(yǎng)基。各種類型生物的克隆技術(shù)在生物工程中均有其重要作用。
“克隆”是從英文“clone”音譯而來,在生物學領(lǐng)域有3個不同層次的含義。
1.在分子水平,克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含義是將某一特定DNA片斷通過重組DNA技術(shù)插入到一個載體(如質(zhì)粒和病毒等)中,然后在宿主細胞中進行自我復制所得到的大量完全相同的該DNA片斷的“群體”。
2.在細胞水平,克隆實質(zhì)由一個單一的共同祖先細胞分裂所形成的一個細胞群體。其中每個細胞的基因都相同。比如,使一個細胞在體外的培養(yǎng)液中分裂若干代所形成的一個遺傳背景完全相同的細胞集體即為一個細胞克隆。又如,在脊椎動物體內(nèi),當有外源物(如細菌或病毒)侵入時,會通過免疫反應產(chǎn)生特異的識別抗體。產(chǎn)生某一特定抗體的所有漿細胞都是由一個B細胞分裂而成,這樣的一個漿細胞群體也是一個細胞克隆。細胞克隆是一種低級的生殖方式-無性繁殖,即不經(jīng)過兩性結(jié)合,子代和親代具有相同的遺傳性。生物進化的層次越低,越有可能采取這種繁殖方式。
3.在個體水平,克隆是指基因型完全相同的兩個或更多的個體組成的一個群體。比如,兩個同卵雙胞胎即為一個克??!因為他(她)們來自同一個卵細胞,所以遺傳背景完全一樣。按此定義,“多利”并不能說成是一個克?。∫驗椤岸嗬敝皇枪聠蔚囊粋€。只有當那些英國胚胎學家能將兩個以上完全相同的細胞核移植到兩個以上完全相同的去核卵細胞中,得到兩個以上遺傳背景完全相同的“多利”時才能用克隆這個詞來描述。所以在那篇發(fā)表于1997年2月出版在《Nature》雜志上的轟動性論文中,作者并沒有把“多利”說成是一個克隆。
另外,克隆也可以做動詞用,意思是指獲得以上所言DNA、細胞或個體群體的過程。
二、克隆技術(shù)
1.DNA克隆
現(xiàn)在進行DNA克隆的方法多種多樣,其基本過程如下圖所示(未按比例)
可見,這樣得到的DNA可以應用于生物學研究的很多方面,包括對特異DNA的堿基順序的分析和處理,以及生物技術(shù)工業(yè)中有價值蛋白質(zhì)的大量生產(chǎn)等等。
2.生物個體的克隆
(1)植物個體的克隆
在20世紀50年代,植物學家用胡蘿卜為模型材料,研究了分化的植物細胞中遺傳物質(zhì)是否丟失問題,他們驚奇地發(fā)現(xiàn),從一個單一已經(jīng)高度分化的胡蘿卜細胞
可以發(fā)育形成一棵完整的植株!由此,他們認為植物細胞具有全能性。從一棵胡蘿卜中的兩個以上的體細胞發(fā)育而成的胡蘿卜群體的遺傳背景完全一樣,故為一個克隆。如此的植物的克隆過程是一個完全的無性繁殖過程!
(2)動物個體的克隆
① “多利”的誕生
1997年2月27日英國愛丁堡羅斯林(Roslin)研究所的伊恩?維爾莫特科學研究小組向世界宣布,世界上第一頭克隆綿羊“多利”(Dolly)誕生,這一消息立刻轟動了全世界。
“多莉”的產(chǎn)生與三只母羊有關(guān)。一只是懷孕三個月的芬蘭多塞特母綿羊,兩只是蘇格蘭黑面母綿羊。芬蘭多塞特母綿羊提供了全套遺傳信息,即提供了細胞核(稱之為供體);一只蘇格蘭黑面母綿羊提供無細胞核的卵細胞;另一只蘇格蘭黑面母綿羊提供羊胚胎的發(fā)育環(huán)境――子宮,是“多莉”羊的“生”母。其整個克隆過程簡述如下:
從芬蘭多塞特母綿羊的乳腺中取出乳腺細胞,將其放入低濃度的營養(yǎng)培養(yǎng)液中,細胞逐漸停止了分裂,此細胞稱之為供體細胞;給一頭蘇格蘭黑面母綿羊注射促性腺素,促使它排卵,取出未受精的卵細胞,并立即將其細胞核除去,留下一個無核的卵細胞,此細胞稱之為受體細胞;利用電脈沖的方法,使供體細胞和受體細胞發(fā)生融合,最后形成了融合細胞,由于電脈沖還可以產(chǎn)生類似于自然受精過程中的一系列反應,使融合細胞也能象受精卵一樣進行細胞分裂、分化,從而形成胚胎細胞;將胚胎細胞轉(zhuǎn)移到另一只蘇格蘭黑面母綿羊的子宮內(nèi),胚胎細胞進一步分化和發(fā)育,最后形成一只小綿羊。出生的“多莉”小綿羊與多塞特母綿羊具有完全相同的外貌。
一年以后,另一組科學家報道了將小鼠卵丘細胞(圍繞在卵母細胞外周的高度分化細胞)的細胞核移植到去除了細胞核的卵母細胞中得到20多只發(fā)育完全的小鼠。如呆“多利”因為只有一只,還不夠叫做克隆羊的話,這些小鼠
就是名副其實的克隆鼠了。
② 通過細胞核移植克隆小鼠的基本過程
在本實驗中,卵丘細胞是經(jīng)如下過程得到的:通過連續(xù)幾次注射絨毛膜促性腺激素,使雌鼠誘導成高產(chǎn)卵量狀態(tài)。然后從雌鼠輸卵管中收集卵丘細胞與卵母細胞的復合體。經(jīng)透明質(zhì)酸處理使卵丘細胞散開。選擇直徑為10-12微米的卵丘細胞用作細胞核供體(前期實驗表明,若用直徑更小或更大的卵丘細胞的細胞核,經(jīng)過細胞核移植的卵母細胞很少發(fā)育到8細胞期)。所選擇的卵丘細胞保持在一定的溶液環(huán)境中,在3小時內(nèi)進行細胞核移植(與此不同的是,在獲得“多利”時用作細胞核供體的乳腺細胞先在培養(yǎng)液中傳代了3-6次)
卵母細胞(一般處于減數(shù)分裂中期 II )通過與上面描述類似的方法,從不同種的雌鼠中收集。在顯微鏡下小心地用直徑大約7微米的細管取出卵母細胞的細胞核,盡量不取出細胞質(zhì)。同樣小心取出卵丘細胞的細胞核,也盡量去除所帶的細胞質(zhì)(通過使取出的細胞核在玻璃管中往復運動數(shù)次,以去除所帶的少量的細胞質(zhì))。在細胞核被取出后5分鐘之內(nèi),直接注射到已經(jīng)去除了細胞核的卵母細胞中。進行了細胞核移植的卵母細胞先放在一種特制的溶液中1-6小時,然后加入二價的鍶離子(Sr2+)和細胞分裂抑素B。前者使卵母細胞激活,后者抑制極體的形成和染色體的排除。再取出處理過的卵母細胞,放在沒有鍶和細胞分裂抑素B的特制的溶液中使細胞分裂形成胚胎。
不同階段的胚胎(從2細胞期到胚泡期)被分別植入幾天前與已經(jīng)結(jié)扎雄鼠交配過的假孕母鼠的輸卵管或子宮中發(fā)育。發(fā)育完全的胎兒鼠在大約19天后通過手術(shù)取出。
目前胚胎細胞核移植克隆的動物有小鼠、兔、山羊、綿羊、豬、牛和猴子等。在中國,除猴子以外,其他克隆動物都有,也能連續(xù)核移植克隆山羊,該技術(shù)比胚胎分割技術(shù)更進一步,將克隆出更多的動物。因胚胎分割次數(shù)越多,每份細胞越少,發(fā)育成的個體的能力越差。體細胞核移植克隆的動物只有一個,就是“多利”羊。
三、克隆技術(shù)的福音
1. 克隆技術(shù)與遺傳育種
在農(nóng)業(yè)方面,人們利用“克隆”技術(shù)培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病蟲害的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)品種,大大提高了糧食產(chǎn)量。在這方面我國已邁入世界最先進的前列。
2. 克隆技術(shù)與瀕危生物保護
克隆技術(shù)對保護物種特別是珍稀、瀕危物種來講是一個福音,具有很大的應用前景。從生物學的角度看,這也是克隆技術(shù)最有價值的地方之一。
3. 克隆技術(shù)與醫(yī)學
在當代,醫(yī)生幾乎能在所有人類器官和組織上施行移植手術(shù)。但就科學技術(shù)而言,器官移植中的排斥反應仍是最為頭痛的事。排斥反應的原因是組織不配型導致相容性差。如果把“克隆人”的器官提供給“原版人”,作器官移植之用,則絕對沒有排斥反應之慮,因為二者基因相配,組織也相配。問題是,利用“克隆人”作為器官供體合不合乎人道?是否合法?經(jīng)濟是否合算?
克隆技術(shù)還可用來大量繁殖有價值的基因,例如,在醫(yī)學方面,人們正是通過“克隆”技術(shù)生產(chǎn)出治療糖尿病的胰島素、使侏儒癥患者重新長高的生長激素和能抗多種病毒感染的干撓素,等等。
克隆”是從英文“clone”音譯而來,在生物學領(lǐng)域有3個不同層次的含義。
1.在分子水平,克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含義是將某一特定DNA片斷通過重組DNA技術(shù)插入到一個載體(如質(zhì)粒和病毒等)中,然后在宿主細胞中進行自我復制所得到的大量完全相同的該DNA片斷的“群體”。
2.在細胞水平,克隆實質(zhì)由一個單一的共同祖先細胞分裂所形成的一個細胞群體。其中每個細胞的基因都相同。比如,使一個細胞在體外的培養(yǎng)液中分裂若干代所形成的一個遺傳背景完全相同的細胞集體即為一個細胞克隆。又如,在脊椎動物體內(nèi),當有外源物(如細菌或病毒)侵入時,會通過免疫反應產(chǎn)生特異的識別抗體。產(chǎn)生某一特定抗體的所有漿細胞都是由一個B細胞分裂而成,這樣的一個漿細胞群體也是一個細胞克隆。細胞克隆是一種低級的生殖方式-無性繁殖,即不經(jīng)過兩性結(jié)合,子代和親代具有相同的遺傳性。生物進化的層次越低,越有可能采取這種繁殖方式。
3.在個體水平,克隆是指基因型完全相同的兩個或更多的個體組成的一個群體。比如,兩個同卵雙胞胎即為一個克隆!因為他(她)們來自同一個卵細胞,所以遺傳背景完全一樣。按此定義,“多利”并不能說成是一個克隆!因為“多利”只是孤單的一個。只有當那些英國胚胎學家能將兩個以上完全相同的細胞核移植到兩個以上完全相同的去核卵細胞中,得到兩個以上遺傳背景完全相同的“多利”時才能用克隆這個詞來描述。所以在那篇發(fā)表于1997年2月出版在《Nature》雜志上的轟動性論文中,作者并沒有把“多利”說成是一個克隆。
另外,克隆也可以做動詞用,意思是指獲得以上所言DNA、細胞或個體群體的過程。
二、克隆技術(shù)
1.DNA克隆
現(xiàn)在進行DNA克隆的方法多種多樣,其基本過程如下圖所示(未按比例)
可見,這樣得到的DNA可以應用于生物學研究的很多方面,包括對特異DNA的堿基順序的分析和處理,以及生物技術(shù)工業(yè)中有價值蛋白質(zhì)的大量生產(chǎn)等等。
2.生物個體的克隆
(1)植物個體的克隆
在20世紀50年代,植物學家用胡蘿卜為模型材料,研究了分化的植物細胞中遺傳物質(zhì)是否丟失問題,他們驚奇地發(fā)現(xiàn),從一個單一已經(jīng)高度分化的胡蘿卜細胞
可以發(fā)育形成一棵完整的植株!由此,他們認為植物細胞具有全能性。從一棵胡蘿卜中的兩個以上的體細胞發(fā)育而成的胡蘿卜群體的遺傳背景完全一樣,故為一個克隆。如此的植物的克隆過程是一個完全的無性繁殖過程!
(2)動物個體的克隆
① “多利”的誕生
1997年2月27日英國愛丁堡羅斯林(Roslin)研究所的伊恩?維爾莫特科學研究小組向世界宣布,世界上第一頭克隆綿羊“多利”(Dolly)誕生,這一消息立刻轟動了全世界。
“多莉”的產(chǎn)生與三只母羊有關(guān)。一只是懷孕三個月的芬蘭多塞特母綿羊,兩只是蘇格蘭黑面母綿羊。芬蘭多塞特母綿羊提供了全套遺傳信息,即提供了細胞核(稱之為供體);一只蘇格蘭黑面母綿羊提供無細胞核的卵細胞;另一只蘇格蘭黑面母綿羊提供羊胚胎的發(fā)育環(huán)境――子宮,是“多莉”羊的“生”母。其整個克隆過程簡述如下:
從芬蘭多塞特母綿羊的乳腺中取出乳腺細胞,將其放入低濃度的營養(yǎng)培養(yǎng)液中,細胞逐漸停止了分裂,此細胞稱之為供體細胞;給一頭蘇格蘭黑面母綿羊注射促性腺素,促使它排卵,取出未受精的卵細胞,并立即將其細胞核除去,留下一個無核的卵細胞,此細胞稱之為受體細胞;利用電脈沖的方法,使供體細胞和受體細胞發(fā)生融合,最后形成了融合細胞,由于電脈沖還可以產(chǎn)生類似于自然受精過程中的一系列反應,使融合細胞也能象受精卵一樣進行細胞分裂、分化,從而形成胚胎細胞;將胚胎細胞轉(zhuǎn)移到另一只蘇格蘭黑面母綿羊的子宮內(nèi),胚胎細胞進一步分化和發(fā)育,最后形成一只小綿羊。出生的“多莉”小綿羊與多塞特母綿羊具有完全相同的外貌。
一年以后,另一組科學家報道了將小鼠卵丘細胞(圍繞在卵母細胞外周的高度分化細胞)的細胞核移植到去除了細胞核的卵母細胞中得到20多只發(fā)育完全的小鼠。如呆“多利”因為只有一只,還不夠叫做克隆羊的話,這些小鼠
就是名副其實的克隆鼠了。
② 通過細胞核移植克隆小鼠的基本過程
在本實驗中,卵丘細胞是經(jīng)如下過程得到的:通過連續(xù)幾次注射絨毛膜促性腺激素,使雌鼠誘導成高產(chǎn)卵量狀態(tài)。然后從雌鼠輸卵管中收集卵丘細胞與卵母細胞的復合體。經(jīng)透明質(zhì)酸處理使卵丘細胞散開。選擇直徑為10-12微米的卵丘細胞用作細胞核供體(前期實驗表明,若用直徑更小或更大的卵丘細胞的細胞核,經(jīng)過細胞核移植的卵母細胞很少發(fā)育到8細胞期)。所選擇的卵丘細胞保持在一定的溶液環(huán)境中,在3小時內(nèi)進行細胞核移植(與此不同的是,在獲得“多利”時用作細胞核供體的乳腺細胞先在培養(yǎng)液中傳代了3-6次)
卵母細胞(一般處于減數(shù)分裂中期 II )通過與上面描述類似的方法,從不同種的雌鼠中收集。在顯微鏡下小心地用直徑大約7微米的細管取出卵母細胞的細胞核,盡量不取出細胞質(zhì)。同樣小心取出卵丘細胞的細胞核,也盡量去除所帶的細胞質(zhì)(通過使取出的細胞核在玻璃管中往復運動數(shù)次,以去除所帶的少量的細胞質(zhì))。在細胞核被取出后5分鐘之內(nèi),直接注射到已經(jīng)去除了細胞核的卵母細胞中。進行了細胞核移植的卵母細胞先放在一種特制的溶液中1-6小時,然后加入二價的鍶離子(Sr2+)和細胞分裂抑素B。前者使卵母細胞激活,后者抑制極體的形成和染色體的排除。再取出處理過的卵母細胞,放在沒有鍶和細胞分裂抑素B的特制的溶液中使細胞分裂形成胚胎。
不同階段的胚胎(從2細胞期到胚泡期)被分別植入幾天前與已經(jīng)結(jié)扎雄鼠交配過的假孕母鼠的輸卵管或子宮中發(fā)育。發(fā)育完全的胎兒鼠在大約19天后通過手術(shù)取出。
目前胚胎細胞核移植克隆的動物有小鼠、兔、山羊、綿羊、豬、牛和猴子等。在中國,除猴子以外,其他克隆動物都有,也能連續(xù)核移植克隆山羊,該技術(shù)比胚胎分割技術(shù)更進一步,將克隆出更多的動物。因胚胎分割次數(shù)越多,每份細胞越少,發(fā)育成的個體的能力越差。體細胞核移植克隆的動物只有一個,就是“多利”羊。
三、克隆技術(shù)的福音
1. 克隆技術(shù)與遺傳育種
在農(nóng)業(yè)方面,人們利用“克隆”技術(shù)培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病蟲害的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)品種,大大提高了糧食產(chǎn)量。在這方面我國已邁入世界最先進的前列。
2. 克隆技術(shù)與瀕危生物保護
克隆技術(shù)對保護物種特別是珍稀、瀕危物種來講是一個福音,具有很大的應用前景。從生物學的角度看,這也是克隆技術(shù)最有價值的地方之一。
3. 克隆技術(shù)與醫(yī)學
在當代,醫(yī)生幾乎能在所有人類器官和組織上施行移植手術(shù)。但就科學技術(shù)而言,器官移植中的排斥反應仍是最為頭痛的事。排斥反應的原因是組織不配型導致相容性差。如果把“克隆人”的器官提供給“原版人”,作器官移植之用,則絕對沒有排斥反應之慮,因為二者基因相配,組織也相配。問題是,利用“克隆人”作為器官供體合不合乎人道?是否合法?經(jīng)濟是否合算?
克隆技術(shù)還可用來大量繁殖有價值的基因,例如,在醫(yī)學方面,人們正是通過“克隆”技術(shù)生產(chǎn)出治療糖尿病的胰島素、使侏儒癥患者重新長高的生長激素和能抗多種病毒感染的干撓素,等等。
克隆
克隆是英文clone的音譯,簡單講就是一種人工誘導的無性繁殖方式。但克隆與無性繁殖是不同的。無性繁殖是指不經(jīng)過雌雄兩性生殖細胞的結(jié)合、只由一個生物體產(chǎn)生后代的生殖方式,常見的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、莖、葉等經(jīng)過壓條或嫁接等方式產(chǎn)生新個體也叫無性繁殖。綿羊、猴子和牛等動物沒有人工操作是不能進行無性繁殖的。科學家把人工遺傳操作動物繁殖的過程叫克隆,這門生物技術(shù)叫克隆技術(shù)。
克隆的基本過程是先將含有遺傳物質(zhì)的供體細胞的核移植到去除了細胞核的卵細胞中,利用微電流刺激等使兩者融合為一體,然后促使這一新細胞分裂繁殖發(fā)育成胚胎,當胚胎發(fā)育到一定程度后,再被植入動物子宮中使動物懷孕,便可產(chǎn)下與提供細胞者基因相同的動物。這一過程中如果對供體細胞進行基因改造,那么無性繁殖的動物后代基因就會發(fā)生相同的變化。
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