菌種保藏要使用什么菌種?
一、菌種保藏要使用什么菌種?
菌種保藏是指保持微生物菌株的生活力和遺傳性狀的技術(shù)。目的在于把從自然界分離到的野生型,或經(jīng)人工選育得到的變異型純種,使其存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的各種特征和生理活性。
基本原理是使微生物的生命活動處于半永久性的休眠狀態(tài),也就是使微生物的新陳代謝作用限制在最低范圍內(nèi)。
干燥、低溫和隔絕空氣是保證獲得這種狀態(tài)的主要措施。
有針對性地創(chuàng)造干燥、低溫和隔絕空氣的外界條件,就是微生物菌種保藏的基本技術(shù)。選用4℃冰箱進行短時間的菌種保藏。
二、菌種保藏的依據(jù)?
菌種保藏是一切微生物工作的基礎(chǔ),其目的:是使菌種被保藏后不死亡、不變異、不被雜菌污染,并保持其優(yōu)良性狀,以利于生產(chǎn)和科研應(yīng)用。菌種保藏的原理:是為了達到長期保持菌種的優(yōu)良特性,核心問題是必須降低菌種變異率,而菌種的變異主要發(fā)生于微生物旺盛生長、繁殖過程,因此必須創(chuàng)造一種環(huán)境,使微生物處于新陳代謝最低水平,生長繁殖不活躍狀態(tài)。
常用的方法主要有:常規(guī)轉(zhuǎn)接斜面低溫保藏法,半固體穿刺保藏法,液體石蠟保藏法,含甘油培養(yǎng)物保藏法等,沙土管保藏法。
特殊的有:真空冷凍干燥保藏法和液氮超低溫保藏法。
三、臨時保藏菌種的溫度?
保藏方法:將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基上,然后在適宜的溫度下進行培養(yǎng),當菌落長成之后,將試管放置于冰箱中(4°C)進行保藏即可。
四、低溫菌種保藏法特點?
斜面低溫保藏法是一種最常用,最簡便的菌種保藏方法。其特點是:一 簡單易行,適用于各種菇類菌種保存, 是目前生產(chǎn)及科研普遍采用的一種方法。
二 保藏時間短,需六個月轉(zhuǎn)接一次,轉(zhuǎn)管次數(shù) 多菌絲變異的可能性大。
三 如改用橡皮塞并用石蠟扣 ,可保藏11年~3年 。
五、冷凍保藏適宜什么菌種?
菌種保藏是指保持微生物菌株的生活力和遺傳性狀的技術(shù)。目的在于把從自然界分離到的野生型,或經(jīng)人工選育得到的變異型純種,使其存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的各種特征和生理活性
蘑菇可以冷凍,不過冷凍會破壞其細胞壁,造成脫水和營養(yǎng)流失,而且冷凍的蘑菇口感不好。食用蘑菇,又稱食用菌、食用蕈菌、食用真菌,是指具有食用價值的子實體的大型真菌的統(tǒng)稱。
六、甘油保藏菌種實驗步驟?
準備材料:甘油保存菌種時,準備甘油、離心管、槍頭的工具并消毒滅菌。 調(diào)配比例:根據(jù)菌種調(diào)配甘油,一般甘油和菌液的比例是20:80。 控制溫度:根據(jù)冷藏時間使溫度在零下20度或零下70度。 注意事項:嚴格控制溫度。
甘油保存菌種的方法
甘油保存菌種的方法及步驟
1、準備材料
甘油保存菌種時,首先要根據(jù)需要保存的菌種,準備足夠的甘油、離心管、槍頭的工具,其中離心管要準備2ml容量大小,將準備好的工具放在121度的環(huán)境中消毒滅菌20分鐘。
2、調(diào)配比例
根據(jù)菌種調(diào)配甘油,采用20%的甘油來保存菌種,那么甘油和菌液的比例就是20:80,菌種不同甘油的比例也不同,例如鏈球菌屬保存時,除了甘油還需要少量的生理鹽水制作保存液。
3、控制溫度
將純化后的菌種放入調(diào)配好的甘油保存液中,放在零下20度或者零下70度的環(huán)境中冷藏,溫度不同保存的時間長短也不一樣,零下20度的最多只能保存1年,而零下70度的保存時間為2-4年。
4、注意事項
甘油保存菌種時,必須要經(jīng)過消毒滅菌,嚴格控制冷藏的環(huán)境溫度,以免出現(xiàn)菌種死亡或者被污染,另外用來保存的菌種與標準菌菌株的特性不同,冷凍的降溫速度要保持在1度/分鐘。
七、臨時保藏菌種的方法?
可以在固體斜面培養(yǎng)基上菌落長成后,放入冰箱低溫保藏;或者用液體石蠟覆蓋保藏法;還可以將微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。
八、解磷菌種保藏的方法?
傳代保藏菌種是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低溫或者干燥處理時,會很快死亡,為了保存菌種的活性,就要定期不斷的進行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存。
九、如何對白靈菇菌種低溫保藏?
將需要保藏的菌種,接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,菌絲長滿斜面時,用硫酸紙包扎棉塞或者硅膠塞,放置在4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌種)低溫保藏法。由于微生物的新陳代謝活動未停止,試管內(nèi)培養(yǎng)基易失水變干。因此,保藏時間較短,不適于長期保藏。每隔3~6個月應(yīng)轉(zhuǎn)管一次。
草菇菌種不耐低溫,需保藏在10~12℃之間?;蛟诓莨骄渖瞎嘧?~4毫升的防凍劑(10%的甘油)。
當菌絲長滿斜面后,在無菌條件下,用無菌橡皮塞代替棉塞,并用石蠟密封,即可在室溫或冰箱中保藏。
這種方法可防止雜菌污染,隔絕氧氣,避免培養(yǎng)基干燥,使用方便。
據(jù)測定,保藏3年的菌種生活力仍很旺盛。
十、微生物菌種保藏方法?
1、傳代保藏 傳代保藏菌種是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低溫或者干燥處理時,會很快死亡,為了保存菌種的活性,就要定期不斷的進行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存。
2、斜面低溫保藏 將待保藏的菌種接種在合適的斜面培養(yǎng)基上,在相應(yīng)的條件下培養(yǎng)至得到充足的菌體或者孢子,隨后密封試管置于4℃左右保存,具體保存溫度按照保存菌種設(shè)定。保藏時間依微生物的種類從1個月到4個月不等。
3、冷凍干燥保藏 冷凍干燥保藏法為菌種保藏方法中最有效的方法之一,對一般生活力強的微生物及其孢子以及無芽胞菌都適用,這種方法適用于菌種長期保存,一般可保存數(shù)年至十余年。我國大多數(shù)生物制品菌種都是采用該法保藏。
4、半固體穿刺保藏 配制半固體培養(yǎng)基,高壓濕熱滅菌后倒于無菌試管中至約1/3,待培養(yǎng)基凝固,用接種環(huán)從平面培養(yǎng)基上挑取單菌落,穿入培養(yǎng)基若干次。在合適的條件下進行培養(yǎng)至菌體旺盛生長,之后密封試管,根據(jù)菌種特點在4 ℃左右或者涼爽干燥處保存。保存時間至少可以達到1 年,對于有些菌種甚至能達到20 年之久。
5、液氮超低溫保藏 液氮超低溫保藏法是菌種長期保藏的最有效最可靠的方法。液超低溫保藏法是把菌種裝在含有冷凍保護劑的安瓶瓶內(nèi),將該安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。
6、冷凍真空干燥保藏 將處于成熟期的微生物培養(yǎng)物懸浮于無菌的血清、卵白、脫脂奶或者海藻糖等保護劑中制成濃菌液,分裝到無菌的安瓿瓶中,于低溫冰箱中冷凍,達到預(yù)定溫度后對濃菌液進行冷凍干燥處理,之后在真空狀態(tài)下融封安瓿瓶,于20 ℃保藏。
7、蒸餾水保藏 蒸餾水保藏菌種的方法普遍的應(yīng)用于醫(yī)學(xué)微生物、食品微生物和工業(yè)微生物中。將菌體懸浮于蒸餾水中,即可在室溫下保存數(shù)年,此法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
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