紅掌種植方法全過程？

一、脫盆取出

紅掌移栽最好選在春秋兩季，氣候適宜，能減少傷害，也能促進(jìn)長勢恢復(fù)。在移栽之前，先從花盆的土壤中取出來，選擇生長健壯、長勢良好、沒有病蟲害的幼苗當(dāng)作移栽植株。將花盆移到空曠的位置，松動土壤，將植株取出來，根部要帶有原土。

二、修剪處理

紅掌在移栽之前，要先進(jìn)行修剪處理。準(zhǔn)備好鋒利消毒好的剪刀，將底部的根系適當(dāng)修剪，過密的根系進(jìn)行疏剪，還需摘除掉枯黃老化的葉子，也能減少養(yǎng)分的消耗，利于移栽后成活生長。

三、準(zhǔn)備盆土

在紅掌移栽之前，先準(zhǔn)備好盆土條件。根據(jù)幼苗的大小選好花盆，花盆材質(zhì)要通透，能利于排水。選擇肥沃疏松、透氣性好的土壤，可用腐葉土、泥炭土、珍珠巖、河沙混合配制，混入少量的基肥，做好殺菌消毒處理。

四、上盆栽種

在花盆中鋪上一層土壤，在土壤中央位置挖坑，將紅掌植株扶正栽種到坑穴中，往根部覆蓋土壤。栽種好后，輕輕壓緊土壤，促使根系貼合土壤，往土壤中澆足澆透水，放在陰涼通風(fēng)處緩苗，避開直射光。等到長勢恢復(fù)后，可以增加光照，摘除掉發(fā)黃枝葉。

植物組織培養(yǎng)一般方法？

植物組織培養(yǎng)可以分為四個階段：

（1）建立無菌體系，即外植體及培養(yǎng)基的消毒、接種，獲得愈傷組織或器官。

（2）進(jìn)行增殖，不斷分化產(chǎn)生新的植株，或直接產(chǎn)生不定芽及胚狀體，也可以根據(jù)需要反復(fù)進(jìn)行繼代培養(yǎng)，以達(dá)到大量繁殖的目的。

（3）將植株轉(zhuǎn)移進(jìn)行生根培養(yǎng)，可以轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，也可以直接切取進(jìn)行扦插生根。

（4）試管苗過渡，即試管苗出瓶后進(jìn)行一定時間對外界環(huán)境的適應(yīng)過程。

家庭組織培養(yǎng)

植物的組織培養(yǎng)沒有最基本的條件和物品是搞不成的，當(dāng)時合理的利用一些最簡單的用具也并非無法辦到。

一、最必需的物品

1、.家用高壓鍋 1個最好大一點的，裝的東西多一點。用于培養(yǎng)基、無菌水等的消毒

2、接種箱 （無菌箱）1個 ，需要自己自制，用一些木板和一塊玻璃和二尺布料。用于接種和轉(zhuǎn)移。

3、藥用天平1架 最好是500g稱量的，小一點也可以，主要用來稱瓊脂、糖等物品。

4、不銹鋼鍋或鋁鍋（煮湯、面條的那種）買。用于煮制培養(yǎng)基用的。

5、攪拌和分裝培養(yǎng)基用的調(diào)羹一個，用于煮制和分裝培養(yǎng)基。

6、培養(yǎng)用的瓶子若干，

7、制棉塞用的棉花、紗布和線若干，用于做瓶口的塞子，要注意的是，棉花要使用普通做棉衣的棉花，不要用醫(yī)院用的脫脂棉，這樣容易穿塞污染。

8、牛皮紙、橡皮圈若干，用于包瓶頭和扎包頭紙用。

9、酒精燈1盞、解剖刀1把，刀片若干、鑷子2把、10ml、100ml量筒各一個，2ml移液管1只、藥棉若干。

二、怎樣解決蒸餾水和基本藥品

培養(yǎng)基的用水在一般人的心目總是覺的十分重要的，其實是多余的擔(dān)心。冷開水、清潔的河水都是給以用的，并不影響培養(yǎng)的效果。市場上出售的純凈水更是一般培養(yǎng)基理想的用水。最常用、最必要、用量最大的只需購買以下幾種就行了。

1、MS培養(yǎng)基的大量元素（家庭或所謂袖珍組培室的培養(yǎng)一般采用MS基就可以了。）共5種。也可以買市售的MS培養(yǎng)基

（1）、硝酸銨

（2）、硝酸鉀

（3）、 氯化鈣

（4）、硝酸鎂

（5）、磷酸二氫鉀

2、酒精

3、精密試紙（PH 5.4－7.0）

4、漂白粉或漂白精

5、瓊脂

6、白糖

7、福爾馬林

8、高錳酸鉀（可以到醫(yī)院或藥材商店去買）

9、微量元素、鐵鹽、維生素類以及激素類藥品應(yīng)用量極少。比如一些激素、維生素類的藥品及有針劑也有片劑，他們都有比較準(zhǔn)確的含量，你可以去按你的需要去配制比例。

愛好者在家庭環(huán)境下進(jìn)行組織培養(yǎng)的探討與建議植物組織培養(yǎng)技術(shù)，尤其是快速繁殖，并非只有專業(yè)人員和專業(yè)實驗室才能夠完成的。作為對多肉植物和組織培養(yǎng)有著濃厚興趣的愛好者，在充分利用家庭條件的基礎(chǔ)上，同樣可以制備出自己的試管苗來的。在我們進(jìn)行多肉植物的栽培中認(rèn)識到，一些比較名貴的園藝品種，比如：萬象、玉扇、壽、高紋鷹爪等十二卷屬品種，還是繽紛橄欖、何魯牽牛等塊莖類植物，甚至于星球?qū)?、巖牡丹屬等等，這些植物的常規(guī)繁殖系數(shù)很低，他們都可以采用組織培養(yǎng)來解決其繁殖問題，并且可以得到相當(dāng)數(shù)量的幼苗。對于奇想天外等種子萌發(fā)困難的植物，同樣可以借助組織培養(yǎng)來進(jìn)行無菌播種。在進(jìn)行組織培養(yǎng)過程中，不但可以對培養(yǎng)的植物有更深一層的認(rèn)識，對常規(guī)的栽培有著相當(dāng)大的意義。許多搞組織培養(yǎng)的專家，最初都不是專業(yè)學(xué)組培的，就是憑著興趣和探索精神取得輝煌成績的。關(guān)鍵是，愛好者有著濃厚的興趣，非凡的觀察力和細(xì)致入微的操作，這些都可以彌補非專業(yè)的缺陷，并且可以充分利用日常生活中的各種可利用資源，這些就足以讓愛好者在家庭環(huán)境下完成組織培養(yǎng)了。同時這也不僅僅滿足了自己的興趣，還可以有一定的經(jīng)濟(jì)收益，甚至可以有所創(chuàng)新和發(fā)明。

一、如何解決場地和基本設(shè)備：

進(jìn)行組織培養(yǎng)，沒有一定的設(shè)備是無法開展的。正規(guī)實驗室的組織培養(yǎng)設(shè)備是昂貴的，不適合家庭消費，但如果能有途徑買到廉價的實驗室設(shè)備，那就在好不過了。如果沒有辦法搞到實驗室設(shè)備，就不妨動手自己制作一些簡單的設(shè)備。

1.無菌操作的主要設(shè)備――接種箱和壓力鍋：

接種箱：植物組織培養(yǎng)的主題操作需要在一個相對密閉的無菌環(huán)境中進(jìn)行。那么說我們首先要創(chuàng)造一個密閉的環(huán)境，可以利用一些木料、塑料板、有機玻璃、鋁合金骨架等等廉價的材料，動手粘合一個小巧的接種箱。具體的參數(shù)可以找一本“食用菌栽培”的書籍，模仿種蘑菇的接種箱做一個即可。需要注意的是，組織培養(yǎng)的接種箱的密閉性要求比較高，盡量避免腐朽的木材和易生銹的材料，箱子的頂端按放兩盞燈：20w的紫外線燈和20w的日光燈。箱體的周邊盡量采用玻璃材料，因為這樣便于觀察，有時候接種箱還可以借用為培養(yǎng)箱，周邊采用玻璃材料更方便于觀察和培養(yǎng)。

高壓鍋：主要用來對培養(yǎng)基和其他材料的滅菌。在實驗室通常使用醫(yī)用高壓滅菌器，然而在家庭要充分利用廚房使用的高壓鍋，高壓鍋的壓力要低于滅菌器，但是適當(dāng)延長滅菌時間，還是可以取得較好的效果的。比如：對培養(yǎng)基滅菌40分鐘就基本上可以達(dá)到滅菌效果（滅菌器是20分鐘）；無菌水采用間歇滅菌法，先用高壓鍋壓40分鐘，放置24小時，再壓20分鐘即可達(dá)到效果。

2.場地：

這個就因人而易了，總體的要求就是進(jìn)行組織培養(yǎng)操作的地方要盡量無塵，減少空氣流動，最好有一定的陽光。比如書房、寫字間都可以用來進(jìn)行無菌操作。

進(jìn)行培養(yǎng)基的配制可以借用一下廚房，但所使用的器具必須和廚具分開。一般說，組織培養(yǎng)中的幾乎全部化學(xué)物質(zhì)對人體是無害的，除了少數(shù)激素類物質(zhì)和滅菌劑。對于有毒害的物質(zhì)，需要認(rèn)真保管，以免發(fā)生危險。

3.輔助設(shè)備：

主要指冰箱，它是用來儲存化學(xué)物質(zhì)和培養(yǎng)基的。天平，可以采用感量在100克的托盤天平，甚至用中藥的藥衡都可以代替。培養(yǎng)架，這個就更簡單了，采用鋁合金-玻璃的培養(yǎng)箱既可以滿足要求，如果日光不足，可配合日光燈補光等。

4.化學(xué)試劑：

化學(xué)試劑是不可缺少的，因為組織培養(yǎng)的核心就是培養(yǎng)基的成分，而并不是簡單的無菌操作。一些用量較大的化學(xué)物質(zhì)是有必要買的，比如大量元素（硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等）、高錳酸鉀、甲醛、酒精、白砂糖、瓊脂等等。微量元素和有機復(fù)合物不需要購買，因為它們的用量很小，我們可以用蔬菜浸汁或者馬鈴薯浸汁來代替。激素是必不可少的，他們的稱量需要借助分析天平，但這是家庭條件所不允許的，如果有條件可以借助關(guān)系單位代替配成母液，每次取一些使用即可。最好的辦法是到農(nóng)資商店（賣農(nóng)藥化肥的地方），它們一般出售農(nóng)業(yè)用的激素，有的是用安瓿裝的，按照一定的比例加入到培養(yǎng)基當(dāng)中即可。近幾年來，有些化學(xué)品公司開始生產(chǎn)植物組織培養(yǎng)基原粉，只需要稱取一定量加水即可，很方便。比如泛生化學(xué)品公司生產(chǎn)的ms原粉，只需要稱量40克，加1升水，用微波爐加熱5分鐘即可分裝，相當(dāng)簡便。

消毒劑通常采用氯化汞（劇毒），如果不容易搞到，可以用漂白粉代替。

調(diào)節(jié)酸堿度時，可以采用家庭常用的純堿和白醋。

5.培養(yǎng)容器和玻璃儀器：

組織培養(yǎng)的容器要求并不高，只要玻璃顏色為透明色即可（鈉玻璃不可以）。

我們可以到垃圾站去看看，撿回一些廢舊的果醬瓶就可以了。比較好用的是阿香婆辣醬瓶，我們實驗室也是采用的這種瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可，如果不好找到，可以采用微波爐專用的錫箔紙甚至方便面的袋子，折疊成雙層，用橡皮圈固定即可。

其它玻璃儀器，比如燒杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替；一些度量儀器，如量筒和移液管最好到玻璃儀器商店購買，恐怕花不了20元錢就可以配置一套相當(dāng)棒的組培玻璃儀器。

6.其它：

還有一些用品是必需的。比如精密ph試紙（5.4~7.0），需要買一本，大約花1.5元即可搞定；酒精燈也不需要買，用墨水瓶配上一個玻璃環(huán)，再加上一個棉花芯，最后用農(nóng)夫山泉礦泉水的瓶蓋做燈冒，這樣的酒精燈很小巧，適合接種箱使用。刀子剪子鑷子是必需的，到花市的工具攤位上，花10元錢全部搞定，注意選比較小巧的工具。

關(guān)于用水，按理說應(yīng)該使用蒸餾水，但是我們家庭飲用的純凈水比蒸餾水還要純，那么說借用一些飲用水就可以了。我們曾經(jīng)采用康師傅純凈水進(jìn)行動物細(xì)胞的培養(yǎng)，效果都是很不錯的，更何況于植物細(xì)胞培養(yǎng)了。

以上是組織培養(yǎng)的基本設(shè)備和試劑，主要突出了他們相關(guān)的替代品，因為作為組織培養(yǎng)中的快速繁殖，它的要求是相當(dāng)?shù)偷摹Ｎ覀兊募彝ヅ囵B(yǎng)和工廠化是不同的，工廠化生產(chǎn)組培苗要追求高增殖率，所以它的要求就比較精細(xì)和標(biāo)準(zhǔn)。我們的家庭培養(yǎng)則不需要那么準(zhǔn)確，只要達(dá)到培養(yǎng)成功的目的即可。當(dāng)然，如果想提高增殖倍率和試管苗的品質(zhì)，必須盡量貼近實驗室的用具和器材，代用品總是有一定的缺陷的。

（一）必須的設(shè)施物品及代用品

1、代用品

家庭用的電冰箱，可用于貯存培養(yǎng)基母液（4℃）及需低溫貯存的藥品（如生物調(diào)節(jié)劑）。

高壓鍋：它可用于培養(yǎng)基、無菌水、玻璃器皿及其他組培用具的消毒滅菌。如所用水硬度大可用涼白開水，進(jìn)行消毒滅菌。避免被消毒滅菌物品表面結(jié)垢。

不銹鋼鍋或鋁鍋：它可用于培養(yǎng)基、溶化瓊脂（起水浴鍋作用）及組培用具消毒滅菌。

刷凈的廢棄食油桶：它可以用來貯存蒸餾水。

小白瓷碟：可以用于接種及盛放消毒液（若放消毒液，就不要再食用，以免中毒）。

日光燈：它可用于組培過程中光源補充。

洗凈廢棄的罐頭瓶：它可以用于組培培養(yǎng)之用，代替錐形瓶、試管。

組培場地可在自己的房間內(nèi)進(jìn)行。在配制培養(yǎng)基和接種時，不要趕在家庭成員較多時進(jìn)行，如室內(nèi)已安裝了空調(diào)，那么在初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)、乃至小苗過渡時均有好處。

2、自制用具

（1）接種箱的制作：組培過程中的超凈工作臺是很貴重的設(shè)備。如果我們用自制的接種箱來代替，就可以大大節(jié)省開支，有利于普及。

自制的接種箱的用料，可以是膠合板、纖維板、玻璃（3毫米厚）、木條（裝修房屋用的龍骨），甚至可以用使紙板的包裝箱（包裝箱的質(zhì)量要稍好一些的，如電視機的包裝箱），也可以用有機玻璃。

其接種箱的大小，可以根據(jù)各自的家庭條件制作。制作太小不便于操作，但相對來說消毒容易，且占地較少；制作較大的便于操作，但消毒工作顯得不易，且占地面積較多。一般來說作成70厘米長、45厘米寬。50厘米高較為合適。

（2）培養(yǎng)箱的制作：培養(yǎng)箱可代替培養(yǎng)室，也可以用于過渡苗使用。它可以用玻璃制作，或利用長方形魚缸。因此，可用玻璃粘結(jié)制作。其大小可按自己家庭居室面積和組培的量來決定。

3、需購置用具

普通天平（500克）：用于稱量配制培養(yǎng)基藥品，或用稱量金銀、中藥的戥子稱，用于稱量配制培養(yǎng)基藥品、微量元素及生物調(diào)節(jié)劑；或購買微量元素及生物調(diào)節(jié)劑時，買已分裝的。酒精燈1盞：用于接種時，灼燒消毒滅菌。漏斗（亦可用購買桶裝食用油，所配給的漏斗）：用于分裝培養(yǎng)基用。長鑷子2把：用于接種。解剖刀2把、刀片若干：用于接種。10、50、100毫升量筒各1個：用于配制培養(yǎng)基用。長把牛角勺2把：用于配制培養(yǎng)基取藥品。1、2、5毫升移液管各1個：用于配制培養(yǎng)基用。

耐高溫塑料膜或牛皮紙：用于包扎培養(yǎng)瓶口及表糊自制接種箱內(nèi)部棱角處。橡膠圈：用于綁扎培養(yǎng)瓶口。脫脂棉：用于操作人員及組培用具酒精棉球消毒。pH(5～7）試紙1本：用時可剪成小條檢測培養(yǎng)基pH值。酒精1瓶：用于酒精燈及消毒。漂白粉1瓶：用于消毒。福爾馬林1瓶：用于接種箱消毒（在每次操作前2～10小時，將10～20毫升福爾馬林倒入小白瓷碟內(nèi)，在操作前取出）。MS培養(yǎng)基所需藥品；用于配制培養(yǎng)基。鹽酸及氫氧化鈉：用于調(diào)pH值。如若購置1盞紫外燈，進(jìn)行室內(nèi)及接種箱消毒更為理想。

（二）操作時注意事項

家庭操作與單位不同，因而要注意以下事項：要注意安全，妥善保管藥品。特別對老人和小孩；操作時要消毒仔細(xì)嚴(yán)格，接種時操作人員戴好口罩、工作帽，避開電風(fēng)扇及大風(fēng)沙天氣，家庭成員多時避免操作；消毒前后避免家庭所養(yǎng)寵物進(jìn)人工作間；藥品稱量要準(zhǔn)確無誤；如果家庭不具備溫度調(diào)控（如調(diào)溫空調(diào)），應(yīng)避免在盛夏、寒冬進(jìn)行；紅掌組培要一步步來作，可先作容易組培的花卉，待取得經(jīng)驗后再做難作的花卉。

1.培養(yǎng)容器和玻璃儀器的準(zhǔn)備：

進(jìn)行培養(yǎng)基的配制首先要準(zhǔn)備好培養(yǎng)瓶和配制使用的玻璃儀器。培養(yǎng)瓶一般使用各種果醬瓶，要先用洗潔精浸泡瓶子4~8小時，再用流水沖洗數(shù)次。其他的玻璃儀器同樣需要這樣清潔，直到玻璃壁上不掛水珠而是成為水膜為止。清洗完畢的玻璃容器要倒扣，空去瓶內(nèi)的水。

清洗干凈的容器要注意防塵，盡量放置在玻璃柜中。更簡單的是用干凈的毛巾將容器蓋住。

移液管要用吸球來清洗，反復(fù)用蒸餾水吹吸直到潔凈為止，將移液管放置在一個長筒中，便于使用。一般移液管只能使用一次，即要清洗，所以有多必要準(zhǔn)備幾只移液管，建議：10ml/2支，5ml/2支，1ml/5支。

2.培養(yǎng)基的配制：

經(jīng)典的組織培養(yǎng)用培養(yǎng)基是ms配方，其基本上劃分為：大量元素、微量元素、鐵鹽、有機復(fù)合物、植物激素、糖和支持物。這些成分的用量都在毫克級，用普通天平是難以稱量的，為了解決這個問題，我們可以按比例放大各成分的用量配制成母液，使用的時候按一定比例加入即可。

下面將一種ms培養(yǎng)基的母液配制方案公布如下：

大量元素：硝酸銨66.0克；

硝酸鉀76.0克；

無水氯化鈣13.3克；

七水硫酸鎂14.8克；

磷酸二氫鉀6.8克。

以上分別溶解后合并定容到1升，每配制1升標(biāo)準(zhǔn)ms培養(yǎng)基取25毫升。

鐵鹽：七水硫酸亞鐵5.56克；

乙二胺四乙酸二鈉（edtana）7.46克。

以上兩種分別加熱溶解，混合，定容到1升，調(diào)整ph到5.5以下，每配制一升ms取5毫升。

微量元素和有機復(fù)合物的用量過于微小，為了簡便我們可以用蔬菜提取液或者馬鈴薯提取液代替。通常我們習(xí)慣用100克菠菜加100ml的水煮沸10分鐘，過濾留濾液，每配制1升ms培養(yǎng)基加入20~50毫升提取液。同樣也可以使用帶皮馬鈴薯100克加200毫升水煮沸15分鐘，過濾留濾液，每升ms加入50~100毫升即可。

加入上述各組分后，每升ms培養(yǎng)基還需要加入白砂糖30克，瓊脂7克。

這里要說明的是，糖和瓊脂都是可變的量，要根據(jù)需要調(diào)整。另外制作果凍用的卡拉膠也可以代替瓊脂，透明度更好。

上述各成分加入后，定容到800毫升左右，用微波爐加熱，直到瓊脂全部溶解為止。此時加入所需的植物激素（通常配制成0.1%溶液，這樣每取1毫升，換算到培養(yǎng)基中就是1ppm）。然后加水定容到1100毫升（1.1升），之所以多出0.1升是為了抵消分裝和消毒中的損耗。最后用酸堿調(diào)整ph到5.8~6.0。

3.使用ms原粉配制培養(yǎng)基：

目前國內(nèi)的一些化學(xué)品公司開發(fā)了簡便的ms培養(yǎng)基原粉，大大簡便了培養(yǎng)基的配制，根據(jù)不同公司的說明選擇培養(yǎng)基的種類。下面就以ms原粉為例： ms培養(yǎng)基原粉，包括了大量元素、微量元素、鐵鹽、有機復(fù)合物、糖和瓊脂，一般按使用方法稱量，微波爐加熱溶解，加入激素，定容到1100毫升（1.1升），調(diào)整ph值到5.8~6.0。

4.分裝：

將配制好的培養(yǎng)基分裝在培養(yǎng)容器中，注意要趁熱分裝，因為瓊脂在40度以下就會凝固。每個培養(yǎng)瓶裝培養(yǎng)基大約是瓶容積的1/6~1/5，注意不要將培養(yǎng)基掛在瓶的外壁，這樣容易造成污染。分裝后用聚丙烯薄膜或著方便面的袋子封口，用膠圈固定（膠圈盡量選擇自行車的內(nèi)胎，這種膠圈比較耐熱）。

5. 滅菌：

采用家庭壓力鍋消毒，建議到醫(yī)療器械用品商店買一些“滅菌效果試紙”，它們可以指示滅菌效果，當(dāng)滅菌達(dá)到效果時會變色。把試紙和培養(yǎng)基同時放入鍋內(nèi)，加熱到有大量蒸汽冒出，再加上壓力伐，維持小火30~40分鐘。

滅菌完畢后自然冷卻，將培養(yǎng)基取出，放在陰涼無塵處備用。

6. 接種箱的準(zhǔn)備：

新制作的接種箱必須要清潔干凈，盡量做到無死角。每次使用前2小時，將操作所需要的全部物品放入接種箱，再用一個小燒杯加入3~5克高錳酸鉀放入接種箱內(nèi)，在箱內(nèi)向燒杯中倒入2~3毫升的甲醛溶液，大約幾秒鐘后會看到甲醛蒸汽出現(xiàn)，這樣可以對接種箱內(nèi)的所有物品進(jìn)行初次消毒；同時打開紫外線燈照射。紫外線燈是高電壓穿激汞蒸汽產(chǎn)生的，紫外線進(jìn)行第二道滅菌，在紫外線照射大約15分鐘后，會激發(fā)氧氣形成臭氧，臭氧作為第三道滅菌防線，這樣經(jīng)過三次滅菌，接種箱基本上可以達(dá)到無菌標(biāo)準(zhǔn)。

在操作前15分鐘內(nèi)，向剛才蒸發(fā)甲醛用的燒杯中倒入5毫升濃氨水，因為甲醛對人體有毒害作用，氨水可以和甲醛形成一種叫做“六亞甲基四胺”的固體物質(zhì)，從而中和了甲醛的刺激性蒸汽。這個時候紫外燈不要關(guān)掉，要繼續(xù)照射，直到操作前5分鐘關(guān)閉，維持黑暗5分鐘，然后再打開日光燈進(jìn)行操作。維持5分鐘黑暗的原因是，紫外光對微生物的殺滅是作用于dna的胸腺嘧啶，形成四聚體，但是微生物具有一種光復(fù)活蛋白，可以在有可見光的環(huán)境下還原胸腺四聚體，而使微生物復(fù)活，這個作用叫做“光復(fù)活作用”，所以在關(guān)掉紫外燈后必須維持黑暗幾分鐘，避免光復(fù)活作用的出現(xiàn)。

怎樣在家庭開展組培工作

制備

家庭組培因受到條件的限制，不可能配置大量的配養(yǎng)基，，一般每次配置1升為宜。煮制后用PH試紙測定后，分裝成35－40瓶，塞好棉塞，包好包頭紙。（棉塞一定要用作棉衣的棉花卷制，不能使用脫脂棉，然后用紗布包緊，用棉線扎好。棉塞的松緊以手提棉塞瓶子不滑落為宜。）然后放入高壓鍋里高壓滅菌，待高壓鍋噴嘴噴出蒸汽時，扣上壓力閥，從壓力閥噴氣時起計時，連續(xù)維持15－20分鐘后關(guān)火，壓力消失后，打開鍋蓋，取出配養(yǎng)基，放入接種箱內(nèi)待用。初次實驗時，滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)放置三五天后，觀察無霉菌生長時才能使用。如有霉菌長出，這說明滅菌時間不夠，，需要適當(dāng)增加滅菌時間。

接種

將滅菌后的配養(yǎng)基、無菌水、消毒藥水及使用的器材放入接種箱內(nèi)，因接種箱內(nèi)的體積相對較小，所以所用的一切物品都要有序地擺放在相應(yīng)的位置上，不能隨意擺放，箱內(nèi)濕度較大，點酒精燈一定要是用打火機，不要使用火柴。要特別注意準(zhǔn)備好裝污水、污物的容器，盡可能地大一些，因為操作時是不容許開箱取物的。把所有的物品放置好以后，將一裝有10－20ml福爾馬林的磁杯放入箱內(nèi)（最好不要使用玻璃杯，因反應(yīng)時溫度較高，容易炸裂。），倒入2－5g高錳酸鉀（PP粉），使其蒸氣充滿箱內(nèi)，達(dá)到滅菌的效果。這時要將接種箱的通氣孔和操作孔封閉好，避免甲醛蒸氣很快散盡。待箱內(nèi)蒸氣散盡后，才能開始接種工作，這段時間大約需要5－10個小時。

接種時，揭去密封在接種箱通氣孔和操作孔上的密封物，取出熏蒸用的磁杯，將接種用的材料送入接種箱內(nèi)，開啟紫外線燈，十五分鐘后關(guān)閉紫外線燈，開啟照明燈，即可開始工作。操作時一定要樹立無菌觀念，要把一切物品都看成是帶菌的，要時時都注意防范。工作是由于箱內(nèi)溫度較高，濕度較大，手容易出汗，所以每接種一瓶后都要用酒精擦拭手指，也可以戴指套。另外，操作時要注意防火，由于空間較小，一不小心就容易燒傷手指或引起酒精起火。打開瓶塞時，要將瓶口置于酒精燈上方，用右手的無名指和小指夾住棉塞尾，輕輕將棉塞拔出，棉塞不能置于箱內(nèi)物品上，應(yīng)用手指夾住，接種后，將瓶口在酒精燈上燒灼一下，棉塞也燒灼一下，，然后在酒精燈火焰上方輕輕塞好，扎好包頭紙，用鉛筆標(biāo)明品種、接種日期、編號等，然后重復(fù)下一瓶。

其實，用接種箱接種與超凈工作臺相比較，工作時人要感覺舒適得多。污染率也是很低的，操作熟練后幾乎沒有什么污染發(fā)生。接種后愈傷組織分化、小苗分化、生長狀態(tài)與在超凈臺上接種的沒有什么兩樣。

培養(yǎng)

在家庭的業(yè)余條件下培養(yǎng)培養(yǎng)的條件不可能得到?？?，所以要充分的利用自然條件，接種后的培養(yǎng)瓶可以放在有較強散射光的地方，如靠窗的書柜、寫字臺上，但要避免日光直射，一般室溫在22－28攝氏度時都能正常生長，不是特殊的品種不需要特殊的護(hù)理。如室溫太低，可以用紙板、木條、塑料薄膜做一個簡單的培養(yǎng)箱，里面裝一兩個15－25瓦的白織燈，既可以補助光照也可以提高培養(yǎng)的溫度。夏天溫度過高時，有條件的可以擺放在空調(diào)室內(nèi)，，沒有空調(diào)室的，降溫雖然困難一些，但大多數(shù)試管苗是可以耐受的，不至于死去。小苗長出后，擺放在書柜或工作臺上，感到自己培養(yǎng)出來的生機勃勃的小生靈，無疑是一種享受。

栽培

當(dāng)小苗長到一定的時候，就可以配置一些生根配養(yǎng)基將小苗轉(zhuǎn)移培養(yǎng)生根，待長出一定根系時，就可以出瓶種植了。小苗出瓶種植的時候一定要注意以下幾個方面，一是要適當(dāng)降低溫度；二是要增大濕度；三是要嚴(yán)格控制雜菌危害；四是要保證種植介質(zhì)的疏松透氣；五是要保證適當(dāng)?shù)墓庹?。我通常是用跖石、木屑、稻谷殼混合作基質(zhì)，把小苗種植后用百菌清噴霧澆根，蓋上塑料薄膜，少量的小苗干脆用玻璃杯蓋住，大約15天后就能揭去覆蓋物，便可進(jìn)行正常管理了。

家庭開展組培其實也并不是一件什么很困難的事情，只要多開動腦筋，多想一些辦法，做起來也是很容易地。萬事開頭難，辦法總比困難多。我1974年在一個縣烤煙研究所里當(dāng)所長，原來條件不允許，科研經(jīng)費很緊張，剛開始的時候，一年的科研經(jīng)費只有3000元，那年我做過煙草的花藥單倍體、水稻花藥培養(yǎng)、柑桔胚乳培養(yǎng)、黑皮果蔗莖尖組織培養(yǎng)、田三七愈傷組織培養(yǎng)、黑節(jié)草（石斛）種子的無菌培養(yǎng)、體細(xì)胞融合，都獲得了很好的成績，我們就是用這種方法做的，當(dāng)時北京、上海很多的研究單位來看了很吃驚，他們認(rèn)為很珍貴的組培小苗，被我們丟得到處都是，覺的不可思議，他們做不出來的，竟然在我們一個十分閉塞的山區(qū)里可以做出來。我說這個話的意思不是為自己吹噓擺功，而是告訴想從事這個行業(yè)的朋友，不要自己把自己的能量看得太低，也不要迷信權(quán)威、只要自己有信心，嚴(yán)格地按照科學(xué)的規(guī)律去做，沒有什么做不了的，沒有什么辦不到的。

家庭組培培養(yǎng)基的選擇與效果評價

選擇合適的培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)成功的基礎(chǔ)。

選擇合適的培養(yǎng)基主要從以下兩個方面考慮：一是基本培養(yǎng)基；二是各種激素的濃度及相對比例。

MS培養(yǎng)基適合于大多數(shù)雙子葉植物，B5和N6培養(yǎng)基適合與許多單子葉植物，特別是N6培養(yǎng)基對禾本科植物小麥、水稻等很有效，White培養(yǎng)基適合于根的培養(yǎng)。

首先試用這些培養(yǎng)基進(jìn)行初步實驗，可以少走彎路，大大；減少時間、人力和物力的消耗。當(dāng)通過一系列初試之后，可再根據(jù)實際情況對其中的某些成分做小范圍調(diào)整。

在進(jìn)行調(diào)整時，以下情況可供參考。一是當(dāng)用一種化合物作為氮源時，硝酸鹽的作用比銨鹽好，但單獨使用硝酸鹽會使培養(yǎng)基的PH向堿性方向漂移，若同時加入硝酸鹽和少量銨鹽，會使這種漂移得到克服。二是當(dāng)某些元素供應(yīng)不足時，培養(yǎng)的植物會表現(xiàn)出一些癥狀，可根據(jù)癥狀加以調(diào)整，如氮不足時，培養(yǎng)的組織常表現(xiàn)出花色苷的顏色（紅、紫紅色），愈傷組織內(nèi)部很難看到導(dǎo)管分子的分化；當(dāng)?shù)?、鉀或磷不足時，細(xì)胞會明顯過度生長，形成一些十分蓬松，甚至呈透明狀的愈傷組織；鐵、硫缺少時組織會失綠，細(xì)胞分裂停滯，愈傷組織出現(xiàn)褐色衰老癥狀；缺硼時細(xì)胞分裂趨勢緩慢，過度伸長；缺少錳或鉬時細(xì)胞生長受到影響。

培養(yǎng)基外源激素的作用也會使培養(yǎng)物出現(xiàn)上述一些類似的情況，所以應(yīng)仔細(xì)分析，不可輕易下結(jié)論。

植物組織培養(yǎng)一般的的流程